RNA提取过程中如何去除DNA污染?
方法:
1、使用DNA酶DNAseI消化1小时,恒温37度。
2、离心取上清的时候,一定要小心不要取到中间的膜和下面的液体。
3、直接加NaOH溶液与提取液混合搅拌,然后离心就可以了.因为RNA可溶于NaOH溶液,而DNA不可溶,离心后的上清液就不含有DNA了。
用琼脂糖凝胶电泳怎么检测DNA质量,什么是标准?
DNA如果降解或者混有其他杂质比如蛋白质、RNA的话,在电泳中可以检测的到.线性的单一DNA样品一般是单条带,质粒的话可能会有2-3条带.如果条带变宽、变暗、或者变成弥散的DNA条带,表示DNA非特异的降解.‘如果条带变成多条,表示可能被酶切.如果质粒被单酶切,可能变成一条亮带.如果有蛋白质污染,上样孔可能发亮.如果有RNA污染,可能小分子量部分会有弥散.等等.标准是电泳条带亮度.通过亮度可以粗略计算DNA条带的含量.如果DNA有损失,对应的条带会变暗或者消失
如果DNA出现降解或者是混有其他杂质,例如蛋白质、RNA的话,那么琼脂糖凝胶就能够检测得到DNA的质量。
标准主要是通过观察电泳条带的亮度,通过亮度就可以粗略地计算出DNA条带的含量。如果DNA出现损失,对应的条带就会变暗或者是消失。
DNA检测技术有哪些?
基因检查方法是通过测序的办法进行,可以通过一代测序方法RT-PCR或者Sanger。
近年来出现二代测序方法,二代测序方法和一代测序方法明显的不同在于一代是针对个别已知的基因进行检查,效率低。二代检测则是通过高通量,即基因捕获的办法进行检查,既可以对已知的基因进行检查,也可以对未知的基因检查,进而了解更多与疾病诊断、预后和治疗相关的基因改变。
如果从基因检查的取材,即检查材料方面分,可以分为组织学检查和液体活检。液体活检就是对血液、体腔积液,包括胸腔积液或者腹腔积液进行相关的基因检查。
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